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蔗糖酶测定试剂盒 微量法北京索莱宝科技有限公司

金牌供应商

性能参数

产品名称: 蔗糖酶测定试剂盒 微量法
英文名称: Micro Sucrase Assay Kit
产品货号: BC0505
产品规格: 100管/48样
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
产品商标: Solarbio
价    格: 990元
保存与运输: 4℃保存或-20℃保存;
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2021/11/26 8:35:00
浏览人数:93
诚信指数:14871点
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北京索莱宝科技有限公司
地址:
北京市通州区马驹桥镇联东U谷景盛南四街15号85A三层
邮编:
101102
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010-50973129 13720003930
传真:
010-56371281
联系人:
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所在区域:
北京·北京
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产品详细描述

蔗糖酶测定试剂盒产品内容:

提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1 支,4℃保存,用时加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 4℃保存一周;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,常温保存;

    标准品粉剂×1 支,4℃保存,用时加入1mL蒸馏水充分溶解,制备10mg/mL葡萄糖标准溶液待用;用不完的试剂 4℃保存一周;

产品说明:

蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。

本试剂盒采用3.5-二**水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二**水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水操作步骤:

蔗糖酶测定试剂盒

一、 样品测定的准备:

1.样品的准备:

按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.标准品的制备:

将标准品用蒸馏水稀释至10.80.60.40.2mg/mL

二、 加样表和测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。

2、样本测定,(在EP管中依次加入下列试剂):

试剂名称(μL

对照管

测定管

标准管

试剂一

15

15

15

蒸馏水

15

 

 

样本

30

30

30

试剂二

 

15

15

置于 25℃准确水浴 10min

试剂三

30

30

30

混匀, 100℃水浴 5min 左右(盖紧,防止水分散失),冷却至室温

蒸馏水

210

210

210

混匀,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中测定各管540nm 吸光值,ΔA=A 测定-A对照,每个测定管需设一个对照管。

标准曲线的建立:以标准品的浓度为x轴,540nm下的吸光度(A标准管-A对照管)y轴,绘制标准曲线。

 

三、蔗糖酶测定试剂盒蔗糖酶活力计算:

1、 根据标准曲线,将Ay)带入公式中计算出x值(mg/mL)。

2、 按照蛋白浓度计算

单位定义:每mg 组织蛋白每分钟催化水解1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=(1000×x×V1÷(V1×Cpr)÷T=100×x÷Cpr

3、 按样本鲜重计算

单位定义:每g 组织每分钟催化水解1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

蔗糖酶活力(μg/min/g 鲜重)= (1000×x×V1÷(V1×W)÷T=100×x÷W

10001mg/mL=1000μg/mLV1:加入反应体系中样本体积,0.1mLV2:加入提取液体积,1mLT:反应时间,10minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本鲜重,g



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